扁担杆提取物体内抗肿瘤作用研究
摘 要：目的：研究药用植物扁担杆提取物体内抗肿瘤作用。方法：采用小鼠宫颈癌（U14）移植性肿瘤模型，观察扁担杆根皮乙醇提取物及其不同极性溶剂萃取物对肿瘤生长的抑制作用。结果：小鼠灌服扁担杆提取物10d后，总提取物及其水部位的中、高剂量组可明显抑制U14移植性肿瘤的生长，与阴性对照组相比，有显著性差异（P＜0.01）。结论：扁担杆提取物具有抗小鼠宫颈癌（U14）移植性肿瘤生长作用。
关键词：扁担杆提取物；抗肿瘤；小鼠宫颈癌U14
中图分类号：R730.52文献标识码：A文章编号：1673-2197（2008）07-021-02
扁担杆 (Grewiabiloba G.Don) 为椴树科 (Tiliaceae) 扁担杆属(Grewia)植物，主要分布于江西、湖南、浙江和广东等省［1］。在非洲和亚洲一些国家地区，部分扁担杆属植物被作为民间草药使用，多具有抗菌消炎作用。如南非的Grewia occidentalis和巴基斯坦的Grewia erythraea在民间作为传统草药治疗伤口细菌感染［2，3］；Grewia bicolor在苏丹作为传统草药治疗皮肤脓胞疮，还有镇静作用［4］；《新修本草》记载扁担杆的变种小花扁担杆枝叶煮汁可治小儿蛔虫病；《开宝本草》称其可“主三虫，下气消谷”［5］；《中药大辞典》记载其全株和枝叶能祛风除湿、理气消痞，可治小儿因虫疳积、大人气痞、脾虚食少、妇女崩带、风湿［6］。扁担杆的根皮在江西部分地区，民间用来治疗皮肤脓胞疮等细菌感染。但关于扁担杆的抗肿瘤作用研究还未见报道，本文首次报道了扁担杆根皮乙醇提取物对小鼠宫颈癌（U14）移植性肿瘤生长的抑制活性。
1 实验材料
1.1 实验药品和试剂
扁担杆根皮药材于2006年8月采自江西省萍乡市，原植物由安徽中医学院药学院刘守金副教授鉴定为扁担杆(Grewia biloba G.Don)，凭证标本（No.060801）保存于江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室；环磷酰胺(CTX)（江苏恒瑞医药股份有限公司生产，批号：07102521）。
1.2 实验动物及瘤株
昆明种小鼠，雌性，普通级，体重(20±2.0)g，购于南昌大学医学院医学实验动物科学部；小鼠宫颈癌（U14）肿瘤，购于中国医学科学院药物研究所。
1.3 仪器
TG328A型万分之一电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)；HHS型电热恒温水浴锅 (上海博迅实业有限公司医疗设备厂)；XS-212型显微镜 (江南光电(集团)股份有限公司)。
2 方法
2.1 提取物制备
将扁担杆干燥根皮5.5kg粉碎，用90%乙醇溶液加热回流提取3次，每次2h，合并提取液，滤过，浓缩，干燥，得总浸膏550g。将总浸膏用水溶解混悬，依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取，将乙酸乙酯、正丁醇萃取液和剩余的水相溶液浓缩、干燥，得乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位。每克总浸膏相当于10克生药，用时以生理盐水配成所需浓度。
2.2 体内抗肿瘤实验［7］
无菌条件下抽取传代7～9d生长良好的U14的小鼠腹水，用生理盐水按1∶4稀释成细胞悬液(细胞数为2.5～3×107／mL)，每只小鼠右腋皮下接种0.2mL。接种后随机分成生理盐水模型对照（NS）组、环磷酰胺（CTX，25mg•kg-1•d-1）组、高（500mg•kg-1•d-1）、中（250mg•kg-1•d-1）、低（100mg•kg-1•d-1）剂量给药组，每组10只。接种24h后开始灌服给药，每天固定时间段给药1次并记录小鼠的活动情况。给药前称体重，连续给药10d，末次给药24h后称体重，处死，完整剥离肿瘤、肝脏、脾脏、胸腺等组织，经生理盐水洗涤后用滤纸吸干称重，计算抑瘤率和免疫器官指数（脾脏指数和胸腺指数）。
抑瘤率(％) = (对照组平均瘤重-实验组平均瘤重)／对照组平均瘤重×100％。
胸腺指数 = 胸腺重量 (mg)／体重 (g)；
脾脏指数 = 脾脏重量 (mg)／体重 (g)。
2.3 统计学处理
所得数据用SPSS13.0 统计软件进行单因数方差分析处理，数据用x±s表示，实验组与对照组比较用t检验。
3 结果
3.1 模型评定
模型符合要求［7］，实体瘤生长良好，阴性对照组小鼠平均瘤重＞1.0g。阳性对照组有明显抗实体瘤生长作用，抑瘤率＞40%。
3.2 小鼠活动情况观察
CTX组小鼠进食量较阴性对照组明显减少，毛发干枯、蓬松、无光泽，且有中度腹泻，体质消瘦，活动迟缓。而总浸膏组、水部位组小鼠较阴性对照组活动敏捷，进食量增加。
3.3 对小鼠移植瘤U14的抑制作用
结果表明扁担杆总提取物和水部位的3个不同剂量组对小鼠U14肿瘤均有较强的抑制作用，且呈现明显的量效关系，和阴性对照组相比均有显著性差异(P＜0.01)。其中高剂量组500mg/kg (相当于生药5g/kg)、中剂量组250mg/kg (相当于生药2.5g/kg) 的抑瘤率均大于30%（见表1）。
4 讨论
本实验研究表明，扁担杆总提取物和水部位组平均瘤重明显低于阴性对照组，其高、中剂量组对小鼠宫颈癌（U14）的抑制率均＞30%，与阴性对照组相比有显著性差异 (P＜0.01)，且不同剂量组之间呈现明显的量效关系。根据中草药提取物抗癌有效的一般标准［7］（实体瘤抑瘤率＞30%，统计学分析有显著性差异），扁担杆乙醇提取物具有明显的抗小鼠宫颈癌（U14）作用，其活性部位为水部位。
参考文献：
［1］ 中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志(第一分册)［M］.北京：科学出版社，1989：89.
［2］ D.S.Grierson，A.J.Afolayan.Antibacterial activity of some indigenous plants used for the treatment of wounds in the Eastern Cape，South Africa ［J］.Journal of Ethnopharmacology，1999，66(1)：103~106.
［3］ Mudassir A.Zaidi，Sidney A.Crow Jr.Biologically active traditional medicinal herbs from Balochistan，Pakistan ［J］.Journal of Ethnopharmacology，2005，96(1)：331~334.
［4］ M.W.J.M.Jaspers，A.K.Bashir，J.H.Zwaving，etal.Investigation of Grewia bicolor juss ［J］.Journal of Ethnopharmacology，1986，17(3)：205~211.
［5］ 唐慎微.经史证类备急本草［M］.北京：人民卫生出版社，1975：354.
［6］ 江苏新医学院编.中药大辞典［M］.上海：科技出版社，1986：1747.
［7］ 徐叔云，卞如濂，陈修.药理实验方法学（第3版）［M］.北京：人民卫生出版社，2002：1757~1783.
（责任编辑：姜付平）
